HILICpak
HILIC일 수도 있고 아닐 수도 있습니다.
HILIC분석 니즈의 다양화에 대응합니다.

역상, 순상에서 분석이 까다로웠던 문제를 Aminopropyl을 수식한 HILIC컬럼을 도입하여 분석의 다양화에 기여하였습니다. 이에 더해 증가하고 있는 고 극성물질의 분석 수요, 샘플 유도체화, 이온쌍 시약 사용으로부터 오는 분석 재현성 확보에 어려움에 대응하기 위하여 Shodex에서는 HILIC컬럼의 라인업을 확대하였습니다.

고정상에 수식된 Functional group에 의한 분리 모드 분포

기존의 Asahipak NH2P는 Aminopropyl을 수식하여 HILIC과 Ion exchange를 동시에 수행할 수 있습니다. Shodex는 분석 물질에 맞추어 사용할 수 있는 HILIC범위를 확대시키기 위하여

  • ■ Carboxyl
  • ■ Diol
  • ■ Tertiary amine
  • ■ Quaternary Ammonium
  • ■ Carboxyl
  • ■ Diol
  • ■ Tertiary amine
  • ■ Quaternary Ammonium

을 Functional group으로 수식한 컬럼을 개발하여 보다 다양한 분야의 분석에 대응이 가능하게 되었습니다.

HILICpak 컬럼 4종의 대응 범위

이러한 조건 하에, 이동상의 조절로 HILIC에 가까운 분석 혹은 Ion exchange, Reversed phase에 가까운 분석을 할 수 있습니다.

어떤 분석에 최적화된 컬럼?

각 컬럼에 수식된 Functional group에 맞게 분석 물질에 따라 최적의 결과를 도출할 수 있습니다.

분석 물질에 대응되는 컬럼의 성능은 아래 도표를 참조해주시기 바랍니다.

VG-50 VT-50 VC-50 VN-50 NH2P
Functional Group Teritary Amino Quateranry Ammonium Carboxyl Diol Secondary/
Primary amino
산성 화합물 X
염기성 화합물 X
중성(양성) 화합물

( ◎ : 최적, ○ : 적합, △ : 보통,  X : 부적합 )

HILICpak VG-50 Specification
(Gel : Polyvinylalcohol(PVA))
  • 환원당 회수 용이
  • 보다 개선된 내구성
  • LC/MS 및 ELSD적용에 최적
  • 환원당 회수 용이
  • 보다 개선된 내구성
  • LC/MS 및 ELSD적용에 최적

3급 아미노기 채용으로 환원당 회수를 보다 용이하게

일반적인 아미노기 컬럼(Asahipak NH2P)은 아래 반응과 같이 고정상과 환원당이 시프(Schiff)염기를 형성하여 당류 회수율이 저하되는 문제가 발생합니다. 이를 해결하고자 일반적인 아미노기 대신 3급 아미노기(Teritary amine group)을 채용하여 시프염기 형성을 억제 → 당류 흡착을 방지시켜 회수율을 대폭 향상시켰습니다.

또한, 높은 친수성을 가지는 고정상을 구현하여 HILIC 분석 모드에서 강한 머무름(Retention)을 보입니다.

다음은 당사의 동종 컬럼인 Asahipak NH2P와 환원당 회수율을 비교하였습니다.

시프염기 형성으로 회수율이 낮았던 Mannose, Galactose, Arabinose등과 같은 당류의 회수율이 95%를 상회하는 것을 확인할 수 있습니다.

이외에 다양한 당류 분석 Retention table은 아래 자료를 참조해주시기 바랍니다.

1. 표준 컬럼 & Semi-micro 컬럼

Product Code Product Name Plate Number
(TPN/column)
Functional group Particle size
(μm)
Pore Size
(Å)
Size (mm)
I.D. x Length
F6730200 HILICpak VG-50 4D ≥ 5,500 Amino 5 100 4.6 x 150
F7630100 HILICpak VG-50 4E ≥ 7,500 Amino 5 100 4.6 x 250
F6711100 HILICpak VG-50G 4A (guard column) Amino 5 4.6 x 10
F7630300 HILICpak VG-50 2D ≥ 8,500 Amino 5 100 2.0 x 150
F6711200 HILICpak VG-50G 2A (guard column) Amino 5 2.0 x 10

*VG-50 2D, VG-50G 2A 재질은 PEEK입니다.

Product Name Max. Usable Pressure
(MPa)
Usual Flow Rate
(mL/min)
Max. Usable Flow Rate
(mL/min)
Usable Temp. Range
(°C)
Usable pH Range Shipping Solvent
VG-50 4D 10 0.5 to 1.0 1.5 4 to 60 2 to 13 H2O/CH3CN=20/80
VG-50 4E 15 0.5 to 1.0 1.5 4 to 60 2 to 13 H2O/CH3CN=20/80
VG-50G 4A 0.5 to 1.0 1.5 4 to 60 2 to 13 H2O/CH3CN=20/80
VG-50 2D 15 0.1 to 0.2 0.45 4 to 60 2 to 13 H2O/CH3CN=15/85
VG-50G 2A 0.1 to 0.2 0.45 4 to 60 2 to 13 H2O/CH3CN=15/85
2. 이동상 조건
Product Name Methanol(MeOH) Acetonitrile(ACN) Water(in salt)
HILICpak VG 0 to 100% 0 to 100% 0 to 100%
HILICpak VT-50 Specification
(Gel : Polyvinylalcohol(PVA))
  • LC/MS 분석 적합
  • 음이온성 물질 분석
  • Glyphosate
  • LC/MS 분석 적합
  • 음이온성 물질 분석
  • Glyphosate

3유도체화 반응(PCR), 이온쌍 시약(Ion pair reagent) 첨가 없이 LC/MS분석 실현

역상모드에 의해 분석되는 음이온성 물질은 일반적으로 이동상에 이온쌍 시약을 첨가하거나 유도체화 반응과 같은 전처리가 필요합니다. 이러한 반응은 조작자, 실험환경에 따라 재현성의 문제가 발생할 수 있습니다. 이에 HILICpak VT-50 컬럼을 이와 같은 전처리 과정 없이 다양한 음이온성 물질의 LC/MS 분석이 가능합니다.

HILICpak VT-50 컬럼의 분리 원리

아래는 실제로 생체시료에 별다른 전처리 없이 G6P를 분석한 사례입니다.

분석 샘플 : 마멋 혈청을 한외여과(Ultrafilteration) 후 DIW에 50배 희석

1. Semi-micro 컬럼

Product Code Product Name Plate Number
(TPN/column)
Functional group Particle size
(μm)
Pore Size
(Å)
Size (mm)
I.D. x Length
F6730400 HILICpak VT-50 2D ≥ 4,500 Quarteranry ammonium 5 100 2.0 x 150
F6711300 HILICpak VT-50G 2A (guard column) Quarteranry ammonium 5 100 2.0 x 10

*VG-50 2D, VG-50G 2A 재질은 PEEK입니다.

Product Name Max. Usable Pressure
(MPa)
Usual Flow Rate
(mL/min)
Max. Usable Flow Rate
(mL/min)
Usable Temp. Range
(°C)
Usable pH Range Shipping Solvent
VT-50 2D 10 0.2 to 0.3 0.5 4 to 60 2 to 13 25 mM HCOONH4 aq.
/CH3CN=15/85
VT-50G 2A 0.2 to 0.3 0.5 4 to 60 2 to 13 25 mM HCOONH4 aq.
/CH3CN=15/85
2. 이동상 조건
Product Name Methanol(MeOH) Acetonitrile(ACN) Water(in salt)
HILICpak VT 0 to 100% 0 to 100% 0 to 100%
HILICpak VC-50 Specification
(Gel : Polyvinylalcohol(PVA))
  • 양이온성 물질 분석
  • 아미노산 LC/MS 분석
  • 양이온성 물질 분석
  • 아미노산 LC/MS 분석

3아민류, 양이온성 화학물 분석에 적합

HILICpak VC-50 컬럼은 카르복시기(COOH) 고정상을 채용하여 아민류, 양이온성 화합물 분석에 적합합니다. 이동상 조건에 따라 HILIC분리를 기반으로 역상, 이온교환모드로 유연하게 분석이 가능한 특징을 가지고 있습니다.

HILICpak VC-50 Gel 구조

1. Semi-micro 컬럼

Product Code Product Name Plate Number
(TPN/column)
Functional group Particle size
(μm)
Pore Size
(Å)
Size (mm)
I.D. x Length
F6730700 HILICpak VC-50 2D ≥ 3,500 Carboxyl 5 100 2.0 x 150
F6711600 HILICpak VC-50G 2A (guard column) Carboxyl 5 100 2.0 x 10

*컬럼 재질은 PEEK입니다.

Product Name Max. Usable Pressure
(MPa)
Usual Flow Rate
(mL/min)
Max. Usable Flow Rate
(mL/min)
Usable Temp. Range
(°C)
Usable pH Range Shipping Solvent
VC-50 2D 10 0.1 to 0.3 0.5 4 to 60 2 to 12 H2O
VC-50G 2A 0.1 to 0.3 0.5 4 to 60 2 to 12 H2O
2. 이동상 조건
Product Name Methanol(MeOH) Acetonitrile(ACN) Water(in salt)
HILICpak VC 사용 불가 0 to 100% 0 to 100%
HILICpak VN-50 Specification
(Gel : Polyvinylalcohol(PVA))
    • HILIC + SEC
    • 올리고당 분석
    • 올리고 DNA 분석
    • HILIC + SEC
    • 올리고당 분석
    • 올리고 DNA 분석

3올리고당 분석에 딱

HILICpak VN-50 컬럼은 DIOL 고정상을 채용하여 충전제 표면을 고도로 친수화 시켰습니다. 이로 인하여 올리고당과 같이 기존의 SEC방법으로는 분리가 까다로웠던 십 수량체로부터 20량체 전후까지 HILIC모드로 분석이 가능합니다.

HILICpak VN-50 Gel 구조

아래 덱스트란 가수분해물(Hydrolyzed Dextran)을 분석하여 VN-50 컬럼의 기능을 간단히 소개 드립니다.

1. 표준 컬럼 & Semi-micro 컬럼

Product Code Product Name Plate Number
(TPN/column)
Functional group Particle size
(μm)
Pore Size
(Å)
Size (mm)
I.D. x Length
F6730500 HILICpak VN-50 4D ≥ 10,000 Diol 5 100 4.6 x 150
F6711400 HILICpak VN-50G 4A (guard column) Diol 5 4.6 x 10
F7630600 HILICpak VN-50 2D ≥ 3,500 Diol 5 100 2.0 x 150
F6711500 HILICpak VN-50G 2A (guard column) Diol 5 2.0 x 10

*VN-50 2D, VN-50G 2A 재질은 PEEK입니다.

Product Name Max. Usable Pressure
(MPa)
Usual Flow Rate
(mL/min)
Max. Usable Flow Rate
(mL/min)
Usable Temp. Range
(°C)
Usable pH Range Shipping Solvent
VN-50 4D 10 0.3 to 1.0 1.5 4 to 60 2 to 13 H2O/CH3CN=25/75
VN-50G 4A 0.3 to 1.0 1.5 4 to 60 2 to 13 H2O/CH3CN=25/75
VN-50 2D 10 0.05 to 0.3 0.5 4 to 60 2 to 13 H2O/CH3CN=25/75
VN-50G 2A 0.05 to 0.3 0.5 4 to 60 2 to 13 H2O/CH3CN=25/75
2. 분취 컬럼
Product Code Product Name Plate Number
(TPN/column)
Functional group Particle size
(μm)
Pore Size
(Å)
Size (mm)
I.D. x Length
F6830100 HILICpak VN-50 10E ≥ 11,000 Diol 5 100 10.0 x 250
F6711400 HILICpak VN-50G 4A (guard column) Diol 5 4.6 x 10
3. 이동상 조건
Product Name Methanol(MeOH) Acetonitrile(ACN) Water(in salt)
HILICpak VN 0 to 100% 0 to 100% 0 to 100%